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普通生物顯微鏡的使用

[2011/5/28]

  一、顯微鏡的使用方法

  ㈠準備工作:首先將顯微鏡的工作臺擦干凈,然后將要觀察的標本和各種器具準備好。

  ㈡顯微鏡的使用

  ⒈取用:將顯微鏡從鏡箱取出,取出時一手握鏡臂,一手托底座將其輕放在離工作臺邊緣8-10厘米處,偏左的位置。

  ⒉低倍鏡的使用

  ⑴對光:對光前,先安上合適的目鏡(一般采用10×目鏡),將10×、40×、100×物鏡按照順時針安在物鏡轉換器上,逆時針轉動轉換器使10×物鏡對準載物臺中央的通光孔。從目鏡中觀察,同時調節反光鏡或接通電源,直至視場明亮、均勻為止。

  使用雙目顯微鏡對雙目鏡寬度要進行調節,用推或拉的方法調節兩目鏡之間的距離,直到在兩個目鏡上雙眼同時觀察時,兩個圖形的視場正好完全重合,此時鏡筒刻度盤上所示的數字,就是觀察者兩眼瞳孔之間的距離。

  根據物鏡的放大倍數調節聚光鏡的高度,使用油鏡時由于放大倍數大,鏡像亮度小,需要較強的照明,需要將聚光鏡升至最高處。

  調節可變光闌(光圈)使聚光鏡的鏡口率與物鏡的鏡口率一致,才能充分發揮舞靜的分辨率,方法為:將顯微鏡調整到工作狀態后,從目鏡筒中拔出目鏡,一邊觀察(向拔出目鏡的目鏡筒里看),一邊縮小光闌,這時可看到縮小的光闌被物鏡成的像,然后逐漸調大光闌,當光闌像的邊緣與物鏡通光孔黑圈的邊緣一致時停止,這時的聚光鏡鏡口率與物鏡鏡口率就一致了。如顯微鏡可變光闌圓框上刻有表示口徑的標尺,可調至物鏡鏡口率的80%,即物鏡鏡口率為0.65,則可變光闌的標尺調至0.65×80%=0.52即可。

  ⑵觀察:將標本放置在載物臺上,使標本對準通光孔正中,下降鏡筒或升高載物臺,并從側面觀察,使物鏡下端和標本逐漸接近,但不能碰到蓋玻片。從目鏡觀察,用粗準焦螺旋慢慢升起鏡筒和下降載物臺直到看到標本為至,再調節細準焦螺旋至物像清晰。

  ⒊高倍鏡的觀察

  在低倍鏡下,找到要進一步觀察的部位,移至視野中心,再上升聚光鏡、逆時針轉動物鏡轉換器換上高倍鏡。合格的顯微鏡操作距離是由低倍鏡轉換到高倍鏡時剛好合用的,一般稍為調節一下細準焦螺旋即可看到清晰的物像。

  ⒋油鏡的觀察

  在高倍鏡下看到標本后,把需要進一步放大的部位移至視野中心。上升鏡筒或下降載物臺約1.5厘米。將物鏡轉離光軸,在蓋玻片所要觀察的部位上滴一滴香柏油,把光闌升至最大。換上油鏡,小心調節粗準焦螺旋,使油鏡慢慢下降或慢慢上升載物臺,從側面觀察油鏡下端與標本之間的距離,當油鏡的下端開始觸及油滴時即可停止。從目鏡觀察,調節細準焦螺旋,直至看清標本物像。

  觀察完畢,上升鏡筒或下降載物臺,將油鏡轉離光軸,用干的擦鏡紙輕輕地吸掉油鏡和蓋玻片上的油,再用浸濕二甲苯的擦鏡紙擦拭兩三次,最后用干凈的擦鏡紙再擦拭兩三次。

  ㈢觀察后的處理工作

  清潔:顯微鏡上的污物(殘物或灰塵),用擦鏡紙擦干凈,若擦不干凈可蘸少許二甲苯進行擦拭。

  顯微鏡各部分的放置:擦完后,把物鏡轉離光軸,把反光鏡轉到與載物臺垂直的方向,以減少灰塵粘落上面,而后罩上鏡套,小心的放回鏡箱內,保存備用。

  二、使用顯微鏡時應注意的事項

  ⒈取放時動作一定要輕,切忌震動和暴力,否則會造成光軸偏斜而影響觀察,而且光學玻璃也容易損壞。

  ⒉由于物鏡的螺絲口容易損傷,安裝物鏡時要特別小心,即先向左方倒轉一小段,凹凸雙方吻合后再向右方旋轉,不要轉的太緊,輕輕捻到頭,再稍緊即可。

  ⒊鏡檢標本應嚴格按照操作程序進行,觀察時要從低倍鏡開始,看清標本后再轉用高倍鏡、油鏡。

  ⒋使用油鏡時一定要在蓋玻片上滴油后才能使用。油鏡使用完后,應立即將鏡頭、蓋玻片上的油擦干凈,否則干后不易擦去,以致損傷鏡頭和標本。但應注意二甲苯用量不可過多,否則,物鏡中的樹膠溶解,透鏡歪斜甚至脫落,蓋玻片移動甚至連同標本一起融掉。

  ⒌使用時不可用手摸光學玻璃部分,如需擦拭應嚴格按照光學部件擦拭辦法。

  ⒍使用的蓋玻片和載玻片不能過厚或過薄。標準的蓋玻片為0.17±0.02毫米,載玻片為1.1±0.04毫米。過厚或過薄將會影響顯微鏡成像及觀察。

  三、生物顯微鏡的擦拭和保養

  ㈠擦拭

  ⒈光學部分的擦拭

  順序:吸耳球吹――毛筆、刷子和羽毛輕刷――擦鏡紙輕擦——擦鏡紙蘸二甲苯輕擦。

  鏡頭表面發霉和發霧可用擦鏡紙蘸少量酒精乙醚混合液(3:7)輕擦。內表面發霉和發霧,一般無法清除,所以嚴防發生。

  ⒉機械部分的擦拭

  用干凈的軟布擦拭,或用擦鏡紙蘸二甲苯輕擦,不得用酒精和乙醚,因為這些試劑會侵蝕油漆,容易把油漆擦掉。

  ㈡保養

  防潮、防塵、防腐蝕、放熱

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