【冷凍真空干燥機】

　　基本原理

　　高真空狀態下，利用升華原理使預先凍結的物料中的水份直接從冰態升華為水蒸汽而被除去，從而使物料干燥。真空冷凍干燥廣泛應用于多種產品，可確保物品中蛋白質、維生素等各種營養成份，特別是那些易揮發熱敏性成份不損失，因而能最大限度地保持原有的營養成份。還能有效防止干燥過程中的氧化，可以避免營養成份的轉化和狀態變化。凍干制品呈海綿狀、無干縮、復水性好、含水份極少，相應包裝后可在常溫下長時間保存和運輸。

　　操作步驟

　　1、系統準備

　　檢查系統是否清潔和干燥，真空泵與冷凍機是否連接，接通電源，檢查排氣口、冷凍管的密封性。

　　2、加樣

　　樣品需要預冷到至少-40℃，可以在深低溫冰箱(-70℃)或者液氮(-196℃)中進行。打開密封管開關，搬開冷凍艙，將樣品置于冷凍艙里的隔板上。關閉密封管開關。

　　3、冷凍

　　打開冷凍開關，等待20～30分鐘，直到冷凍艙的溫度低于-40℃。

　　4、抽真空

　　打開真空泵開關，等待10～15分鐘，直到系統壓力低于100 millitorr。

　　5、監控過程

　　確保系統參數(冷凍溫度、真空壓力)在正常范圍內;

　　定期檢查冷凍艙中的結冰情況，決定是否要除霜;

　　觀察樣品是否干燥完全，一般干燥過程需要24～72小時，視具體樣品通過目測而定。

　　6、關閉系統

　　關閉總開關，接上排氣管或打開密封管開關以解除真空狀態。

　　關閉真空開關，關閉冷凍開關，取出樣品。

　　7、系統維護

　　除霜：冷凍艙下面的壓縮艙內如果有霜，則接上排水管，然后用少量熱水(不能超過壓縮艙容積的一半)促進冰霜的融化。不能通過敲擊冰塊來除霜。

　　除濕：壓縮艙、冷凍艙、真空泵壓縮機以及墊圈等表面的水霧均需擦干。

　　清潔：壓縮艙、冷凍艙可以用溫和的去污劑或蘇打水來清洗，然后干燥并撤去排水管，并重新密封排水孔。

　　泵油：定期檢查油位，排除油霧。

　　注意事項

　　1、樣品要保持冷凍，不能“回融”。

　　大多數溶劑的冰點高于-40℃，所以冷凍艙溫度低于-40℃可以使一般樣品保持冰態。

　　為確保樣品不“回融”，可將冰凍的樣品制成小于20 mm的小塊。

　　2、有毒或有腐蝕性的樣品。

　　最好不要用來冷凍干燥，如果一定要用，則更加需要系統維護，并需要另外定購特定的濾器以保護真空泵。

　　3、真空泵油需保持干凈。

　　微黃或無色的油是干凈的，顏色變深表示有酸污染，霧狀渾濁表示有水污染。有污染時需要更換好油。

　　【自動雙重蒸餾水器】

　　操作說明

　　1.擰開自來水龍頭，讓水流開始較為細小，觀察第一管水位超過石英加熱管;

　　2. 接通電源，按下第一管的ON開關，這時水速仍以細小為主，等待第一管內自來水沸騰，這時候將水流逐漸調大至適中程度;

　　3. 等待第二管內自來水超過石英加熱管，按下第二管的ON開關，第二管隨即加熱，注意觀察兩個管子的水位變化，及時做出調整。

　　4.一般來說有下面三種情況：

　　a→第一管水位過高，接近水蒸氣散出口，這時宜將調整水位的橡膠管放置低于玻璃管位置，待自來水流出至適當位置，將橡膠管回復原位;

　　b→第一管水位過低，調整自來水龍頭加大進水，或者調節橡膠管上控制開關加大進水，乃至關閉電源待進水到適當位置，重新打開電源，繼續蒸餾。

　　C→第二管水位過低，按下第二管的OFF開關，待水位升高超過石英加熱管時再開始蒸餾。

　　5. 雙蒸結束，先關閉控制面板上OFF兩個電源，然后關自來水龍頭。

　　【高壓鍋】

　　操作程序

　　1.打開鍋蓋，倒入蒸餾水，滿至WATER　LEVEL，以后每次使用時，必須補足水滿到WATER　LEVEL。

　　2.把插頭插上電源，按電源開關ON，顯示器指示燈亮起，機器開始進行程序自檢。

　　3.按顯示屏的提示輸入工作密碼。

　　4.放置待滅菌的物品入滅菌室，并旋緊鍋蓋。

　　5.根據所高壓物品的不同，按過程選擇鍵1-6中的某一數字選擇不同的滅菌流程。一般固體滅菌選擇按鍵4，液體滅菌選擇按鍵5。特殊要求的，可以先按下MODE鍵，輸入工作密碼。選擇要重新設置的項目進行修改。

　　6.按啟動鍵START鍵，即開始此滅菌模式。

　　NOTE：須待機器進入正常運行程序后，人方可離開。

　　7.當滅菌流程結束時，響鈴鳴叫30秒。

　　8.確認壓力顯示器的壓力降為0以后，把鍋門把手旋松，讓殘余蒸氣釋出，待5-10分鐘后推開跨桿，準備取出滅菌物品。如需高壓另一鍋，則需重新加水滿到WATER　LEVEL，同時處理廢水收集瓶中的廢水。

　　9.在高壓鍋使用記錄上進行登記。

　　【離心機】

　　操作步驟：

　　1、將離心機打開，儀器此時的工作狀態為最后操作設置的參數。

　　2、平衡離心管，兩兩對稱放入離心機。

　　3、蓋好離心蓋，蓋子鎖上時才能離心。

　　4、選擇操作模式：

　　設置參數：1)離心速度：300rpm~14000rpm;2)離心時間：1min~99min;

　　3)離心溫度：-10℃～40℃;4)最低加速度：1～5個，1最慢

　　5)最低減速度：0～4 coast-down,(0是慣性)

　　(1)手工模式：不重新設置時，按上次設置的參數離心，可以重新設置參數離心。

　　(2)程序模式：可預先設置5個程序儲存，不同的程序按不同的序號，相應的指示燈亮，再按另外的序號可以選另外的程序。

　　(3)瞬時(MOM)操作模式：持續按MOM鍵，可使離心達到最大速度和最大加速度，當放開時離心減慢直到停止，離心時顯示的時間是已經用了的時間(以秒計數)。

　　5、按START鍵，開始離心，綠燈亮。此時顯示實際的離心速度和溫度，時間為剩余時間。

　　6、當設置時間到，離心機通過制動裝置自動停止離心，黃燈亮，可以打開離心蓋。

　　如何設置相應參數?

　　1、用”key-programe”取消錯選的程序。

　　2、用“SOFT ACL”鍵設置加速度：高加速燈滅，低加速燈亮;按住鍵3秒，燈閃爍，用設置離心速度的鍵選擇1～5

　　3、用“SOFT DCL”鍵設置加速度：高減速燈滅，低減速燈亮;按住鍵3秒，燈閃爍，用設置離心速度的鍵選擇0～4

　　4、設置離心溫度、速度和時間：當“SET”燈閃爍時，可以改變參數，用箭頭鍵選擇。設置后3秒，燈停止閃爍，自動確認。

　　如何記憶一個程序?

　　1、在設置的參數閃爍時，按程序鍵1～5，當程序鍵旁的燈亮時，參數被儲存。

　　2、保護程序不被修改：可以在參數閃爍時，按一個程序鍵的同時按下“LOCK PROG(STOP)”鍵。取消保護時再次按程序鍵同時按下“LOCK PROG(STOP)”鍵。

　　警告信息：

　　1、END：在每次離心循環結束時顯示，在進行下一次操作時顯示設置得參數。

　　2、LID:當離心開始而蓋子沒蓋緊時顯示，并報警。

　　3、IMBAL:當離心物品不平衡時顯示，并報警。

　　4、MAIMS:當動力系統出錯時顯示。

　　5、OVERT：當離心室里的溫度>45℃時顯示。

　　6、SET:當設置速度大于最大離心速度時顯示。

　　注意事項：

　　1、離心時不要移動或轉動儀器。

　　2、不要使用說明書不允許使用的轉子和附屬物。

　　3、不能超過最大轉速。

　　4、不使用不適合離心的管子或瓶子。

　　5、不在儀器周圍放置危險品。

　　6、不使用易燃易爆物。

　　【雜交爐】

　　操作步驟

　　1、設置溫度

　　按一下up或down鍵，顯示屏將由亮到暗開始閃爍，此時顯示的是上次設置的溫度。如需改變，則通過up或down鍵來上調或下調。停按5秒鐘后，數字停止閃爍，并開始顯示爐內溫度。(第一次使用前需要至少24小時來穩定加熱器。)

　　2、校準

　　需要校準顯示溫度與實際溫度是否一致。將一枝標準溫度計置于樣品附近，穩定1小時后，比較2者的數值是否一致。

　　如需校準，則同時按住up和down鍵直到顯示屏上數字中前后2個小數點開始閃動，然后用up或down鍵來改變數值，使其與溫度計的參考數值一致。再次穩定加熱器。

　　3、轉速調節

　　轉動開關有3個位置，上位表示開，其轉速可在0～15 RPM之間調節;中位表示關;下位表示短時間轉動，按住才轉動松開即關。

　　維護

　　使用前后觀察系統是否清潔，如果不是，則需要清洗。

　　1、顱腔

　　用肥皂和水進行清洗，然后干燥。如有污染，則用適當的消毒劑清洗，注意不要用含氯漂白劑，否則容易造成損壞。

　　2、接水盤和旋轉架

　　先取下來，然后用同樣的溶液進行清洗。

　　【干膠儀】

　　操作步驟

　　1.將干膠儀的排水管連接到真空泵上，閥門旋到開的位置。

　　2.打開電源開關。

　　3.選擇干膠CYCLE：

　　a.按CYCLE健兩次;

　　b.當燈在閃動狀態時，按RAISE或LOWER健選擇干膠CYCLE。

　　4. 選擇循環溫度：

　　a.按TEMP鍵兩次;

　　b. 當燈在閃動狀態時，按RAISE或LOWER健選擇溫度。

　　5.選擇循環時間：

　　a.按TIME鍵兩次;

　　b. 當燈在閃動狀態時，按RAISE或LOWER健選擇時間。

　　6.將膠放在干膠儀里(將膠放在透明的保護蓋的下面，在膠的表面覆蓋一層塑料薄膜)。

　　7.打開真空泵。

　　8.按START鍵開始干膠程序。

　　9.干膠程序完成后，打開透明的保護蓋，閥門旋到開的位置，然后關掉真空泵。

　　干膠時間的選擇

　　膠的濃度 膠的厚度 80℃所需時間

　　3%至20% 0.375mm　　　　　　　　30min

　　3%至20% 0.5mm 40min

　　3%至10% 0.75mm 40min到60min

　　10%至20% 0.75mm 60min到120min

　　3%至10% 1.5mm 45min到60min

　　10%至20% 1.5mm 60min到120min

　　3%至10% 3mm 60min到120min

　　10%至20% 3mm 120min到180min

　　【Leica熒光顯微鏡】

　　簡要操作步驟

　　1.打開12V/100W Leica的電源開關,至少預熱10分鐘。

　　2.打開顯微鏡的電源開關。

　　3.放置樣品，調好放大倍數、焦距和視野。

　　4.移動light stop至 。

　　5.滑動filter block至相應光路。

　　6.將光線調節旋鈕調到最小。

　　7.鏡下觀察樣品的熒光染色情況。

　　8.如果樣品有微紅色背景，可以將BG 38 filter移動至 ，以消除背景色的干擾。

　　9.如要拍照，需將相機與顯微鏡連接，將顯微鏡上的拉桿拉出，這時在相機上可直接觀察樣品的熒光染色情況，并拍照保存。

　　10.結束后，關掉顯微鏡和12V/100W Leica的電源開關。

　　【PCR儀】

　　操作步驟：

　　-RUN ENTER

　　PROGRAM PROGRAM

　　1、開機：打開開關，視窗上顯示“SELF TEST”,顯示10秒中后，顯示RUN-ENTER菜單：準備執行程序。

　　2、放入樣本管，關緊蓋子。

　　3、如果要運行已經編好的程序，則直接按《Proceed》，用箭頭鍵選擇已儲存的程序，按《Proceed》，則屏幕顯示：

　　-ENABLE DISABLE

　　heated lid

　　按《Proceed》選擇ENABLE，則開始執行程序。

　　-NEW LIST

　　EDIT DELET

　　4、如果要輸入新的程序，則在RUN-ENTER菜單上用箭頭鍵選擇ENTER PROGRAM,按《Proceed》，屏幕顯示

　　Step 1 _TEMP

　　GOTO Opiton End

　　按《Proceed》，1)選擇NEW,命名新的程序，最多8個字母，輸入后按《Proceed》確認(如何輸入字母、數字)。

　　2)輸入程序步驟：名字輸入后，顯示

　　按《Proceed》則可以輸入溫度(0～100℃)，按《Proceed》確認后，則可以輸入孵育時間，用《Select》鍵移動光標，輸入數字，完成后按《Proceed》確認，跳到下一步，輸入方式同上。

　　3)選擇GOTO，輸入循環步驟時鏈接到第幾步(循環數最多可達9999次)(為實際循環數-1)。

　　Step extend

　　Increment slope

　　4) 選擇option,再選擇increment,按《Proceed》確認，輸入初始的溫度，確認后輸入時間，按《Proceed》確認，然后輸入每個循環增加或減少的溫度，增加用正值，減少用負值(-0.1℃～6℃)，按《Proceed》確認。

　　選擇extend, 按《Proceed》確認,輸入每個循環增加或減少的時間(-60～60秒)，按《Proceed》確認。

　　選擇slop(指溫度上升或下降的速率),輸入溫度的改變值(-0.1～1.5℃)按《Proceed》確認，然后輸入加熱或致冷的速度，按《Proceed》確認。

　　4)選擇End,輸入結束步驟。

　　5、輸入完成的程序后，到RUN-ENTER菜單，選擇新程序，開始運行。

　　6、其它：用《pause》可以暫停一個運行的程序，再按一次繼續程序。

　　用《stop》或《Cancel》可停止運行的程序。

　　編輯程序：

　　1、可以用《Cancel》鍵刪除輸錯的值，輸入新的值后按《Proceed》確認。

　　2、對于未輸完的程序，要先輸入END，按《Proceed》將程序儲存后才能刪除。

　　3、刪除已經儲存的程序：從RUN-ENTER菜單中選擇RUN-PROGRAM，按《Proceed》，顯示主菜單，選擇DELET,用《Select》選擇刪除。

　　4、查看程序的步驟：在主菜單上選擇LIST，按《Proceed》，用《Select》將選擇名稱，再按《Proceed》，顯示程序的第一步，用《Select》鍵向前、向后翻頁查看，此時不能改變程序的值。

　　編輯已有的程序：

　　1、從RUN-ENTER菜單中選擇RUN-PROGRAM，按《Proceed》，顯示主菜單，選擇EDIT，按《Proceed》確認，用《Select》鍵選擇要編輯的程序，按《Proceed》顯示程序的第一步。

　　2、用《Select》鍵將光標移到要改變的溫度或循環的值上，鍵入新值，按《Proceed》確認，按《Cancel》刪除鍵入的值，出現空格，鍵入新值后確認。

　　注：一旦值被改變或刪除，原來的值不能恢復，必須重新鍵入。

　　3、編輯時間值：必須重新鍵入小時、分鐘、秒，按《Proceed》。

　　如何設置一個PCR體系：

　　一般分為8步：

　　1、預變性：可用94～95℃，2～10min,一般用5min。

　　2、變性：一般用94℃，30s~2min,一般45s~1min。

　　3、退火：溫度自定，30s~2min。

　　4、延伸：70～75℃，一般72℃，對于〈2kb,<1min;>2kb,每增加1kb加1min。

　　5、循環數：一般25～35個循環。

　　6、最終延伸：72℃，5～15min。

　　7、保存：10℃，時間設為0。

　　8、END。