透析袋的使用方法透析原理

　　透析是指溶質(zhì)從半透膜的一側(cè)透過膜至另一側(cè)的過程，任何天然的(如腹膜)或人造的半透膜，只要該膜含有使一定大小的溶質(zhì)通過的孔徑，那么這些溶質(zhì)就可以通過彌散和對流從膜的一側(cè)移動(dòng)到膜的另一側(cè)。

　　透析的動(dòng)力是擴(kuò)散壓，擴(kuò)散壓是由橫跨膜兩邊的濃度梯度形成的。透析的速度反比于膜的厚度，正比于欲透析的小分子溶質(zhì)在膜內(nèi)外兩邊的濃度梯度，還正比于膜的面積和溫度，通常是4℃透析，升高溫度可加快透析速度。

　　人體內(nèi)的毒物包括代謝產(chǎn)物，藥物，外源性毒物，只要其原子量或分子量大小合適，就能夠通過透析清除體外。其基本原理是彌散和對流。彌散就是半透膜兩側(cè)液體各自所含溶質(zhì)濃度梯度及它所形成的不同滲透濃度，溶質(zhì)從濃度高的一側(cè)通過半透膜向濃度低的一側(cè)移動(dòng)。對流也稱超濾，是指溶質(zhì)和溶劑因透析膜兩側(cè)的靜水壓和滲透壓梯度的不同而跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)的過程。

　　自ThomasGraham1861年發(fā)明透析方法至今已有一百多年。透析已成為生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室最簡便最常用的分離純化技術(shù)之一。在生物大分子的制備過程中，除鹽、除少量有機(jī)溶劑、除去生物小分子雜質(zhì)和濃縮樣品等都要用到透析的技術(shù)。

　　透析只需要使用專用的半透膜即可完成。通常是將半透膜制成袋狀，將生物大分子樣品溶液置入袋內(nèi)，將此透析袋浸入水或緩沖液中，樣品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋內(nèi)，而鹽和小分子物質(zhì)不斷擴(kuò)散透析到袋外，直到袋內(nèi)外兩邊的濃度達(dá)到平衡為止。保留在透析袋內(nèi)未透析出的樣品溶液稱為“保留液”，袋(膜)外的溶液稱為“滲出液”或“透析液”。

　　透析袋的使用方法

　　使用前處理：

　　1. 把透析袋剪成適當(dāng)長度(10-20cm)的小段。

　　2. 在大體積的2%(W/V)碳酸氫鈉和 10mmol/L EDTA(pH8.0)中將透析袋煮沸10分鐘。

　　3. 用蒸餾水徹底清洗透析袋。

　　4. 放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中將之煮沸10分鐘。

　　5.冷卻后，存放于4度，必須確保透析袋始終浸沒在溶液內(nèi)。從此時(shí)起取用透析袋是必須戴手套。

　　6. 用前在透析袋內(nèi)裝滿水然后排出，將之清洗干凈。

　　透析膜 (前處理方法如下)：

　　1. 戴手套把透析膜剪成適當(dāng)長度，浸在蒸餾水中 15 min 泡軟。

　　2. 浸入 10 mM sodium bicarbonate 中，并加熱至 80℃，一邊攪拌至少 30min。

　　3. 換到 10 mM Na2•EDTA 中浸泡 30 min，以新鮮的 EDTA 同樣方法處理三次。

　　4. 再用 80℃ 蒸餾水洗 30 min，然后換到 20% 酒精中，放在 4℃冰箱中保存。