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HPLC系統(tǒng)關(guān)鍵部件的選擇與優(yōu)化

[2024/5/23]

一、輸液泵的選擇與優(yōu)化

輸液泵,作為HPLC(高效液相色譜)系統(tǒng)的心臟,其性能直接決定了整個(gè)系統(tǒng)的穩(wěn)定性和分析結(jié)果的可靠性。在選擇輸液泵時(shí),我們需要考慮以下關(guān)鍵性能:

  1. 流量穩(wěn)定性:RSD(相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差)應(yīng)小于0.5%,這對(duì)于確保定性和定量分析的準(zhǔn)確性至關(guān)重要。
  2. 流量范圍:分析型輸液泵應(yīng)具備0.1至10 ml/min的連續(xù)可調(diào)范圍,而制備型則能達(dá)到100 ml/min或更高。
  3. 輸出壓力:一般應(yīng)能達(dá)到150至300 bar(約1500至3000 kg/cm²),以確保在各種色譜柱和流動(dòng)相條件下均能穩(wěn)定運(yùn)行。
  4. 液缸容積:優(yōu)先選擇液缸容積小的泵,便于清洗和更換流動(dòng)相,特別適用于再循環(huán)和梯度洗脫。
  5. 密封與耐腐蝕性能:泵應(yīng)具有良好的密封性和耐腐蝕性能,以確保長(zhǎng)期穩(wěn)定運(yùn)行。

在泵的類(lèi)型選擇上,目前應(yīng)用最多的是柱塞往復(fù)泵。其優(yōu)點(diǎn)包括液缸容積小、流量調(diào)節(jié)方便、泵壓高等。為克服其輸出的脈沖性,可采用雙泵系統(tǒng)(并聯(lián)或串聯(lián))。并聯(lián)式雙泵在流量重現(xiàn)性上表現(xiàn)更佳,但價(jià)格較高,且故障率相對(duì)較高。

二、進(jìn)樣器的選擇與優(yōu)化

進(jìn)樣器是HPLC系統(tǒng)中連接樣品和色譜柱的橋梁,其性能同樣關(guān)鍵。在選擇進(jìn)樣器時(shí),我們需要關(guān)注以下方面:

  1. 密封性:進(jìn)樣器應(yīng)具有良好的密封性能,以防止樣品泄漏和污染。
  2. 死體積:較小的死體積有助于提高柱效和分離度。
  3. 重復(fù)性:進(jìn)樣器的重復(fù)性直接影響分析結(jié)果的可靠性。
  4. 進(jìn)樣方式:HPLC進(jìn)樣方式包括隔膜進(jìn)樣、停流進(jìn)樣、閥進(jìn)樣和自動(dòng)進(jìn)樣等。不同的進(jìn)樣方式適用于不同的分析需求。
  • 隔膜進(jìn)樣:適用于常規(guī)分析,但不適合高壓條件,且存在記憶效應(yīng)和耐溶劑問(wèn)題。
  • 停流進(jìn)樣:可避免高壓進(jìn)樣,但存在“鬼峰”和保留時(shí)間不準(zhǔn)的問(wèn)題。
  • 閥進(jìn)樣:耐高壓、進(jìn)樣量準(zhǔn)確、重復(fù)性好,是HPLC分析中常用的進(jìn)樣方式。
  • 自動(dòng)進(jìn)樣:適用于大批量樣品的常規(guī)分析,可大幅提高分析效率。

綜上所述,在選擇和優(yōu)化HPLC系統(tǒng)的關(guān)鍵部件時(shí),我們需要綜合考慮其性能、適用范圍和成本等因素,以確保系統(tǒng)的高效、準(zhǔn)確和穩(wěn)定運(yùn)行。


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