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薄層色譜分析免疫染色法在血清陰性APS中的應(yīng)用

[2017/8/29]

目的:在臨床中,存在部分患者有提示APS的臨床癥狀而傳統(tǒng)抗磷脂抗體檢測持續(xù)陰性。對于這部分病例,我們稱之為血清陰性抗磷脂綜合征(SN-APS)。本文探索薄層色譜分析(thin-layer chromatography,TLC)免疫染色法在檢測SN-APS患者血清中抗體的應(yīng)用意義。
  
  方法:收集36名SN-APS患者,19名APS患者,及18名SLE患者,20名抗HCV陽性患者的血清,以及32名健康對照的血清,應(yīng)用TLC免疫染色法檢測抗磷脂抗體。應(yīng)用ELISA方法檢測抗β2GP1抗體,抗膜聯(lián)蛋白A2,抗膜聯(lián)蛋白A5抗體,和抗凝血酶原抗體。Eahy926, 一個(gè)來自人體的內(nèi)皮細(xì)胞系,用SN-APS患者的血清IgG成分孵育后,應(yīng)用Western blot分析磷脂-白介素-1受體相關(guān)激酶(IRAK)和磷脂-NFκB,應(yīng)用細(xì)胞熒光分析檢測分VCAM-1,應(yīng)用ELISA檢測上清中組織因子(TF)。
  
  結(jié)果:TLC免疫染色法在58.3%SN-APS患者中檢測到aPL:抗心磷脂抗體47.2%,抗溶血磷脂抗體41.7%,抗磷脂酰乙醇胺抗體30.5%。36名患者中有6人抗膜聯(lián)蛋白抗體陽性。 Eahy926細(xì)胞系經(jīng)SN-APS患者血清IgG孵育后誘導(dǎo)IRAK磷酸化,NF-κB激活,VCAM-1表面表達(dá)及TF釋放。
  
  結(jié)論:TLC免疫染色法能夠識別SN-APS患者血清中的aPL。此外,研究結(jié)果提示這些抗體在體外有促炎及促凝的作用。

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