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干貨!酶標儀基本知識及其注意事項
[2019/7/12]
酶標儀(MicroplateReader)是對酶聯免疫檢測(EIA)實驗結果進行讀取和分析的專業儀器。酶聯免疫反應通過偶聯在抗原或抗體上的酶催化顯色底物進行的,反應結果以顏色顯示,通過顯色的深淺即吸光度值的大小就可以判斷標本中待測抗體或抗原的濃度。
酶標儀廣泛地應用在臨床檢驗、生物學研究、農業科學、食品和環境科學中,特別在近幾年中,由于大量的酶聯免疫檢測試劑盒的應用,使得酶標儀在生殖保健領域中應用越來越廣泛,同時促進了生殖健康技術水平提高。
目前國內許多計生站系統開展了酶免檢測項目,如:乙肝五項、愛滋病檢測、優生優育系列檢測、激素檢測等。過去多數采用目測方法,報出的結果缺乏科學的依據。例如:某弓形蟲檢測試劑盒中,臨界值規定為:陰性對照品的OD值×2.5,通過目測無法判斷標本孔的反應顏色是否超過臨界值。肉眼進行兩孔之間的顏色比較可能還行,但比較一孔的顏色是否超過另一孔顏色的2.5倍就不可能。
國內多家權威機構,如衛生部臨床檢驗中心和計劃生育系統等多次強調酶標儀的重要性,并要求酶聯免疫檢測試劑應使用酶標儀判讀,酶免試劑的質控也應使用酶標儀,并提供酶標儀測定的原始數據,而各廠家的試劑盒說明書沒有是讓用目測的。同時酶免檢測的項目往往是一些實質性的感染和病變(如:肝炎、愛滋病、優生優育等),判讀更要求嚴謹,由誤診引起的糾紛很難處理。另外,住院手術病人術前的丙肝、愛滋等EIA試劑檢測是避免因輸血引起感染引發的醫療事故糾紛的必要手段,正逐漸被許多單位所采用。
酶標儀的使用注意事項
1、工作環境
酶標儀是一種精密的光學儀器,因此良好的工作環境不僅能確保其準確性和穩定性,還能夠延長其使用壽命。根據DINVDE0871條例,儀器應放置在無磁場和干擾電壓的位置。依據DIN45635-19條例:
儀器應放置在低于40分貝的環境下。
為延緩光學部件的老化,應避免陽光直射。
操作時環境溫度應在15℃-40℃之間,環境濕度在15%-85%之間。
操作電壓應保持穩定。
操作環境空氣清潔,避免水汽,煙塵。
保持干燥、干凈、水平的工作臺面,以及足夠的操作空間。
2、操作注意事項
酶標儀的功能是用來讀取酶聯免疫試劑盒的反應結果,因此要得到準確結果,試劑盒的使用必須規范。許多醫院在使用酶標儀之前是通過目測判斷結果,操作過程隨意性較大,在使用酶標儀后如果不能及時糾正操作習慣,會造成較大誤差。在酶標儀的操作中應注意以下事項:
使用加液器加液,加液頭不能混用。
洗板要洗干凈。如果條件允許,使用洗板機洗板,避免交叉污染。
嚴格按照試劑盒的說明書操作,反應時間準確。
在測量過程中,請勿碰酶標板,以防酶標板傳送時擠傷操作人員的手。
請勿將樣品或試劑灑到儀器表面或內部,操作完成后請洗手。
如果使用的樣品或試劑具有污染性、毒性和生物學危害,請嚴格按照試 劑盒的操作說明,以防對操作人員造成損害。
如果儀器接觸過污染性或傳染性物品,請進行清洗和消毒。
不要在測量過程中關閉電源。
對于因試劑盒問題造成的測量結果的偏差,應根據實際情況及時修改參數,以達到最佳效果。
使用后蓋好防塵罩。