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看完這篇文章,你真的懂自己的移液器嗎?
[2020/7/7]
液器是實驗室的必備常規(guī)設備,是每一位科研工作者,特別是生物、藥物、化學等行業(yè)科研工作者每天都使用的工具,它的耐用性和精確度是大部分使用者最關心的,為了幫助大家選擇適合的移液器、正確使用移液器、延長移液器使用壽命、確保移液精度,此文從介紹移液器最基礎的知識開始,希望對大家有所幫助。
1
工作原理
移液器的工作原理:活塞通過彈簧的伸縮運動來實現(xiàn)吸液和放液。
2
結構
一般包括控制按鈕(不同廠家設計不同,通常也通過此按鈕進行吸液體積調(diào)解)、吸頭推卸按鈕、體積顯示窗、套筒、彈性吸嘴、吸頭。
3
移液模式
隨著移液操作的廣泛應用,可移取液體范圍不斷擴大,對精度要求越來越高,目前主要有2種移液器技術,以滿足不同液體精確移液的需求:
一)內(nèi)置活塞式移液模式
適用于常規(guī)移液操作。活塞位于移液器套筒內(nèi),液體與活塞之間有一段空氣隔離,活塞與液體不接觸。這是實驗室最常見的移液器,使用時需注意不要讓樣品污染活塞,否則會造成樣品的交叉污染。
內(nèi)置活塞式移液模式
1、優(yōu)點:
吸頭一般通用;準確度更高、重復性更好;可設置成多同通道,進行高通量的移液;操作人員即學即會,無需熟練等
2、缺點:
不適宜移取高粘稠度液體、揮發(fā)性較大的液體、易發(fā)生交叉污染、錯誤的使用習慣易造成移液器精度不準甚至移液器內(nèi)部腐蝕等。
二)外置活塞式移液模式
適用于操作高粘度液體。活塞位于移液器套筒外,位于吸嘴內(nèi)部,活塞與液體之間沒有空氣段,活塞為一次性的,對于粘稠度較大的液體,也能實現(xiàn)精確移液,由于無空氣間隔,避免了樣品于空氣接觸可能發(fā)生的氣霧交叉污染,因此也非常適合是珍貴的試劑、生物樣品的移取。
外置活塞式移液模式
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分類
1、按調(diào)節(jié)方式分
可調(diào)量程、固定量程
2、按操作方式分
手動移液器、電動移液器(移液工作站是一種功能更多的移液器,另文闡述)
3、按通道數(shù)分
單道、8道、12道
4、按滅菌方式分
半支滅菌:管嘴連接部件下半支高溫滅菌
整支滅菌:無需拆卸,整支消毒、精度高、壽命長
5、特殊的移液器
(1)瓶口分液器:
工作原理也是平滑和精密的活塞上下滑動。
瓶口分液器是實驗當中最常見的一種儀器裝備,適用一般酸堿和低濃度的強酸強堿以及鹽類。它能夠進行精確的、高重復性的分液操作,而不浪費試劑,同時給操作人員和實驗環(huán)境提供安全保證。
瓶口分液器分為三種,分別為基礎型、有機型和氫氟酸型,基本已經(jīng)覆蓋了實驗室所有的溶劑。基礎型適用于比較廣泛的試劑,包括一般的酸堿鹽溶液,較低濃度的非氧化型強酸強堿和極性有機溶劑(不含非極性有機溶劑和鹵代烴等),如H3PO4、HCl、H2SO4、NaOH、NaCl等。
有機型適用于廣泛的有機溶劑和較高濃度的強酸溶液,如;含氯含氟的有機溶劑、三氟乙酸、四氫呋喃、過氧化物、氯仿、HNO3等。
氫氟酸型,僅適用于HF溶液。由于HF腐蝕玻璃,因此分配器的活塞為陶瓷活塞。
瓶口分液器通過螺口閥固定于試劑瓶上,閉合緊密穩(wěn)固,使溶液的移取過程處于一個封閉系統(tǒng)中,避免了溶液的揮發(fā)、飛濺、翻倒等,降低了對環(huán)境和人的危害,相比量筒式完全開放的移液過程安全的多。在有機合成或者石油化工的實驗室,高粘度、高密度、高揮發(fā)性溶劑并不少見,尤其是石化行業(yè)。此類溶液由于其特殊屬性,難以快速移取,且用傳統(tǒng)的量筒很難進行準確定量。瓶口分液器是完全可以勝任此類溶液的移取的。
也適用于大體量液體的分配,適用于需要反復吸取同一樣液體。更換液體時要注意專業(yè)的清洗。
(2)助吸器
電動助吸器
手動助吸器
早期手段:洗耳球。
助吸器又名移液管控制器,大容量移液器等等。大致可分為電動助吸器和手動助吸器兩種。
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選擇
1、性能:準確性和重復性
主要依據(jù)制造廠商提供的技術數(shù)據(jù),購買后最好對數(shù)據(jù)進行驗證。
2、耐用性/維護:移液器使用壽命長,僅需要很少的維護或維護成本低,這主要取決于移液器所用的材料。對于外殼,應當有較高的耐沖擊性、耐腐蝕性和較低的導熱性(如PVDF材質(zhì));對于活塞,目前市場上主要有不銹鋼、陶瓷和塑料三種材質(zhì)。不銹鋼機械性能好、壽命長,只是不太適合用于強酸強堿的移液;陶瓷則有很高的耐腐蝕性,但機械性能較差。當然,優(yōu)質(zhì)的材料往往意味著更高的價格,所以需要綜合考慮購買價格和壽命的因素。
3、 符合人體工程學原理: 手感舒適,吸排液操作力輕,避免重復性肌勞損,退吸頭力小,主要考慮以下幾點:第一,完成一個移液循環(huán)拇指的移動距離短,意味著舒適度更高;第二,比較相同量程的移液器完成一次排液(一定要按到底)所需的拇指用力,這是影響舒適性的關鍵,用力越少意味著長期使用造成手指損傷的風險越小;第三,裝卸吸頭,同樣是越省力越好;第四,移液器的重量適中,過重會增加手的負擔,但過輕也往往意味著材質(zhì)可能差強人意;第五,其它的輔助設計,如殼體的磨砂設計以及指鉤設計,有助于進一步提高舒適性。
6
一個完整的移液循環(huán)
1、吸頭安裝
正確的安裝方法是把白套筒頂端插入吸頭, 在輕輕用力下壓的同時 , 把手中的移液器按逆時針方向旋轉(zhuǎn)180度 。切記用力不能過猛 ,更不能采取剁吸頭的方法來進行安裝 , 這樣操作會導致吸頭變形而影響精度,嚴重的則會損壞移液器,所以應當避免出現(xiàn)這樣的操作。
2、容量設定
在容量設定時 ,有一個需要特別注意的地方 。當我們從大值調(diào)整到小值時,剛好就行;但從小值調(diào)整到大值時 ,就需要調(diào)超三分之一圈后再返回 ,這是因為計數(shù)器里面有一定的空隙 ,需要彌補。
3、預洗吸頭
在我們安裝了新的吸頭或增大了容量值以后,應該把需要轉(zhuǎn)移的液體吸取 、排放兩到三次 ,這樣做是為了讓吸頭內(nèi)壁形成一道同質(zhì)液膜, 確保移液工作的精度和準度, 使整個移液過程具有極高的重現(xiàn)性。其次, 在吸取有機溶劑或高揮發(fā)液體時, 揮發(fā)性氣體會在白套筒室內(nèi)形成負壓 , 從而產(chǎn)生漏液的情況, 這時就需要我們預洗四到六次 ,讓白套筒室內(nèi)的氣體達到飽和 ,負壓就會自動消失。
4、吸液
先將移液器排放按鈕按至第一停點 , 再將吸頭垂直浸入液面 , 浸入的深度為:P2、P10小于或等于1mm, P20、P100、P200小于或等于2mm, P1000小于或等于3mm, P5ML、P10ML小于或等于4mm(浸入過深的話 ,液壓會對吸液的精確度產(chǎn)生一定的影響,當然 ,具體的浸入深度還應根據(jù)盛放液體的容器大小靈活掌握 ),平穩(wěn)松開按鈕,切記不能過快。
5、放液
放液時 ,吸頭緊貼容器壁, 先將排放按鈕按至第一停點 ,略作停頓以后, 再按至第二停點 , 這樣做可以確保吸頭內(nèi)無殘留液體 。如果這樣操作還有殘留液體存在的話,您就應該考慮更換吸頭了 。
6、卸掉吸頭
卸掉的吸頭一定不能和新吸頭混放, 以免產(chǎn)生交叉污染。
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注意事項
1、吸有液體的移液槍不應平放,槍頭內(nèi)的液體很容易污染槍內(nèi)部而可能導致槍的彈簧生銹。
2、移液槍在每次實驗后應將刻度調(diào)至最大,讓彈簧回復原型以延長移液槍的使用壽命。
3、吸取液體時一定要緩慢平穩(wěn)地松開拇指,絕不允許突然松開,以防將溶液吸入過快而沖入取液器內(nèi)腐蝕柱塞而造成漏氣。
4、為獲得較高的精度,吸頭需預先吸取一次樣品溶液,然后再正式移液,因為吸取血清蛋白質(zhì)溶液或有機溶劑時,吸頭內(nèi)壁會殘留一層“液膜”,造成排液量偏小而產(chǎn)生誤差。
5、濃度和粘度大的液體,會產(chǎn)生誤差,為消除其誤差的補償量,可由試驗確定,補償量可用調(diào)節(jié)旋鈕改變讀數(shù)窗的讀數(shù)來進行設定。
6、可用分析天平稱量所取純水的重量并進行計算的方法,來校正取液器,1ml蒸餾水20℃時重0.9982g。
7、嚴禁吸取有強揮發(fā)性、強腐蝕性的液體(如濃酸、濃堿、有機物等)。